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    甘油醛-3-磷酸脫氫酶的介紹
  • 發布日期:2022-12-13      瀏覽次數:948
    • 該酶是糖酵解反應中的一個酶,由4個30-40kDa的亞基組成,分子量146kDa。該酶基因為管家(house keeping)基因,幾乎在所有組織中都高水平表達,在同種細胞或者組織中的蛋白質表達量一般是恒定的,且不受含有的部分識別位點、佛波脂等的誘導物質的影響而保持恒定,故被廣泛用作抽提total RNA,poly(A)+ RNA,Western blot等實驗操作的標準化的內參。常用的內參有,ACTBβ-actin、β-肌動蛋白)、GAPDH或18S等。目的是在于避免RNA定量誤差、加樣誤差以及各PCR反應體系中擴增效率不均一、各孔間的溫差等所造成的誤差、這些都是管家基因,在各個組織中的表達量相對穩定,其中18S同整個基因譜有關(負責裝配),它在總RNA中占的比例最高。

      轉染了GAPDH相關siRNA的HeLa細胞在轉染后48小時后不斷增殖。 紅:被標記的siRNA;藍:被染色的細胞核;綠色:GAPDH蛋白。

      陰性對照scrambled siRNA)的導入(左)對GAPDH蛋白的表達沒有影響,不過若轉入一個以GAPDH(右)為靶標的siRNA,則會導致GAPDH蛋白表達水平的急劇下降。


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